變應性鼻炎（ａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，ＡＲ）是機 體 接 觸 變應原后由免疫球蛋白 Ｅ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＥ，ＩｇＥ） 介導的鼻黏膜非感染性慢性炎癥性疾病，其典型癥 狀為陣發性噴嚏、鼻癢和鼻塞、流涕等。ＡＲ 的發 病機制復雜，現代研究認為其主要是免疫調節細胞 Ｔｈ１與 Ｔｈ２比例 失 衡 引 起 的 變 應 性 炎 癥 疾 病。當 Ｔｈ１細胞 釋 放 的 干 擾 素－γ（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－γ，ＩＦＮ－γ）等 細胞因子不足時，Ｔｈ２細胞會出現亢進現象，產生大 量的 白 細 胞 介 素－４（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－４，ＩＬ－４）等 細 胞 因 子，從而引 起ＩｇＥ 過 量，引 起 ＡＲ。目前 臨 床 治 療 ＡＲ的藥物種類有糖皮質激素類、抗組胺類、抗白 三烯類等，其中抗組胺類藥物具有良好的安全性、較 少的不良反應等優點而成為臨床常用藥，如氯雷他 定、依巴斯汀。

１ 材料

１．１ 動物及分組

ＳＰＦ級豚鼠７０只，體質量２００～ ２４０ｇ，購于南京市江寧區青龍動物繁殖場［生 產 許 可證號：ＳＣＸＫ（蘇）２０１２－０００８］。將豚鼠隨機分為正 常組，模型組，氯 雷 他 定 組（２ｍｇ／ｋｇ），玉屏 風 散 組 （３ｇ／ｋｇ），蒼耳 子 水 提 取 物 高 劑 量（４ｇ／ｋｇ，相 當 于 成人臨床用量的６倍）、中劑量（２ｇ／ｋｇ）、低劑量（１ ｇ／ｋｇ）組，每組１０只，雌雄各半。

１．２ 藥物與試劑

中藥蒼耳子于２０１７年１０月采 自北京市朝陽區長鄉店，經安徽中醫藥大學方成武 教授鑒定為菊科植物蒼耳 （Ｘａｎｔｈｉｕｍｓｉｂｉｒｉｃｕｍ Ｐａｔｒ．）成熟帶總苞的果實。采用水提取法制備， 濾液加熱濃縮至濃度為０．４ｇ／ｍＬ，備用；將氯雷他 定片溶于蒸餾水，制成２ｍｇ／ｍＬ 的溶液；將玉屏風 散溶于蒸餾水，制成３ｇ／ｍＬ的溶液。 卵蛋白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ；批 號 ９２６Ａ０３４）：北京索萊寶科技有限公司；氫氧化鋁（批 號 ２１６４５－５１－ ２）：上海麥克林生化科技有限公司；氯雷他定（批號 １８０２２５０７３）：西安 楊 森 制 藥 有 限 公 司；玉 屏 風 顆 粒 （批 號 ＺＦＢ１７０４）：云 南白藥集團股份有限公司； ＩｇＥ、ＩＬ－４、ＩＦＮ－γＥＬＩＳＡ 檢測 試 劑 盒（批 號 分 別 為 ２０１８０５１６、２０１８０５２２、２０１８００４２６）：北京 安 迪 華 泰 科 技有限公司。

１．３ 儀器

ＭＳＳ全波長酶標儀（型號 ＲＴ－６０００）： 深 圳 雷 杜 公 司；高 速 冷 凍 離 心 機 （型 號 ＪＷ３０２１ＨＲ）：安徽嘉文儀器公司；渦旋混合器（型號 ＧＬ－８８Ｂ）：其林貝爾儀器制造公司；ＴＳ－１２生物組織 自動脫 水 機；ＢＭ－ＩＸ 生物 組 織 石 蠟 包 埋 機；ＬＥＩＣＡ ２０１６ 輪 轉 式 切 片 機；ＯｌｙｍｐｕｓＢＸ５１ 顯 微 鏡；ＪＤ－ ８０ＩＤ形態學圖形分析系統。

２ 方法

２．１ 模型復制

基礎致敏階段采用腹腔注射、局部 刺激 階 段 采 用 滴 鼻 的 方 法 復 制 ＡＲ 豚鼠 模 型。 ①基礎致敏階段：ＯＶＡ 和氫氧化鋁以１∶１００容積比 溶于生理鹽水中，使 ＯＶＡ 的濃度為０．３％，作為致 敏劑。每只豚鼠腹腔注射１ｍＬ，隔日１次，共致敏 ７次，用時１４ｄ。②局部刺激階段：從第２２—３１天， 對每只豚鼠采用滴鼻法，以５％ ＯＶＡ 生理鹽水溶液 每側５μＬ滴于豚鼠雙側鼻孔，隔日１次。以上步驟 正常組均以等容積生理鹽水代替。 每日滴鼻后，依據鼻癢、流涕、呼吸輕重 程 度 及 噴嚏次 數 多 少 為 評 分 標 準。① 鼻 癢：輕 擦 鼻 幾 次，計１分；撓 鼻 不 止，計２分；不 斷 撓 鼻，計３分。 ②流涕：流至前孔，計１分；過鼻孔，計２分；流涕滿 面，計３分。③呼吸：呼吸急促，計１分；明顯喘息， 計２分；喘息致死，計３分。④噴嚏：滴鼻后３０ｍｉｎ 內１～３個，計１分；４～１０個，計２分；１０個以上，計 ３分。于第２２、２６、３０天滴 鼻 后３０ ｍｉｎ內，觀察 各 組豚鼠的過敏性癥狀，并將各癥狀積分疊加，總分大 于５分者為模型復制成功。

２．２ 分組及給藥

最后一次滴鼻后，根據鼻部行為 學癥狀評分結果重新隨機分為７組。正常組與模型 組豚鼠灌胃給予等容量蒸餾水，其余各組豚鼠分別 灌胃給予相應藥物，連續１４ｄ，每日１次。同時采用 ５％ ＯＶＡ 生理鹽水溶液隔日滴鼻，以維持過敏性癥 狀直至實驗結束。并于給藥后第７、１３天滴鼻后３０ ｍｉｎ觀察過敏性癥狀并進行評分。

２．３ 檢測指標及方法

２．３．１ 鼻部行為學癥狀觀察

模型復制期間，于局 部刺激階段觀察第２２、２６、３０天各組豚鼠的過敏性 癥狀并進行評分。給藥期間，于給藥第７、１３天再次激發，觀察各組豚鼠的過敏性癥狀并記錄最后一次 滴鼻評分。評分標準見“２．１項”。

２．３．２ 鼻黏 膜 組 織 病 理 變 化 觀 察

末 次 給 藥１ｈ 后，用１０％水合氯醛麻醉處死豚鼠，打開鼻蓋骨，暴 露鼻甲及骨性 鼻 中 隔，剝 離 完 整 鼻 黏 膜 后 放 入４％ 甲醛固定，蘇木精－伊紅（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－ｅｏｓｉｎ，ＨＥ）染 色，光學顯微鏡下觀察、拍照、分析。

２．３．３ 血清ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ及ＩｇＥ水平檢測

末次給 藥１ｈ后，用１０％水合氯醛麻醉處死。腹主動脈取 血，推入離心管靜置３ｈ后，４ ℃ ３０００ｒ／ｍｉｎ離心 １０ｍｉｎ，收集血清。根據酶聯免疫吸附試驗試劑盒 說明書 操 作，依 次 檢 測 實 驗 豚 鼠 血 清 中ＩＬ－４、ＩＦＮ－ γ、ＩｇＥ水平。 ２．４ 統計學方法 采用 ＳＰＳＳ１７．０軟件進行統計 學分析。連續型變量采用“均數±標準差（ｘ珚±ｓ）”進 行統計學描述。采用單因素方差分析（數據全呈正 態分布時）或 Ｋｒｕｓｋａｌ－ＷａｌｌｉｓＨ 檢驗（數 據 不 全 呈 正態分布時）比較各組數據。Ｐ＜０．０５為差異有統 計學意義。

３ 結果

模 型 復 制 期 間，從 第１次 滴 鼻 開 始，豚 鼠 ３０ｍｉｎ內均出 現 不 同 程 度 撓 鼻、噴 嚏 癥 狀，但 無 明 顯流涕、呼吸急促等癥狀；從第３次滴鼻開始，復制 模型的豚鼠不僅出現撓鼻不止、噴嚏不斷，還出現流 涕、呼吸急促等癥狀；隨著滴鼻次數的增加，模型豚 鼠過敏性癥狀也越來越明顯。結果說明采用 ＯＶＡ 和氫氧化鋁腹腔注射并局部刺激的豚鼠 ＡＲ模型復 制成功。給藥后，與模型組相比，除玉屏風散組 外，其 他 用藥組 ＡＲ豚鼠鼻部行為學癥狀積分均有不同程度 的降低，但差 異 無 統 計 學 意 義（Ｐ＞０．０５）。結果 說 明蒼耳子水提取物對 ＡＲ豚鼠的過敏性癥狀有一定 影響。

４ 討論

蒼耳子作為臨床治療鼻淵頭痛的常用藥，具有 抗炎、鎮痛、抗過敏、調節免疫等多種藥理作用。在 調節免疫功能方面，蒼耳子水煎液中琥珀酸被認為 可能是蒼耳子調節免疫功能的活性成分之一。 王龍妹等發現，蒼耳子水煎液對細胞免疫作用明 顯。張芩等發現，玉屏風散合蒼耳子散可調節機 體免疫功能。



 

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